背景介绍

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案例分享

在新药筛选领域, CISBIO BIOASSAYS的专利技术HTRF(均相时间分辨荧光,HOMOGENEOUS TIME-RESOLVED FLUORESCENCE ),广泛应用于全球各大制药企业、药物研究所和新药筛选中心。HTRF,简言之,是免洗的ELISA,其结合了荧光共振能量转移(FRET,FLUORESCENCE RESONANCE ENERGY TRANSFER)和时间分辨荧光(TRF, TIME-RESOLVED FLUORESCENCE))两大技术,只需要加液、孵育和读板三个步骤,免去了繁琐而且变异度较大的洗涤步骤,不仅操作简单,而且结果更加稳定、可靠。

近年来,PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂作为一种新型的癌症免疫治疗方法,在多种癌症治疗中取得了惊人的效果。我们选取的案例正是利用HTRF技术筛选PD-1/PD-L1的抑制剂,其实验原理如图1所示。PD-L1和PD1分别融合标签蛋白TAG1和TAG2,它们被各自的抗体识别ANTI-TAG1和ANTI-TAG2。由于抗体上标记有HTRF的供体荧光染料EU和受体荧光染料XL665,所以当PD-L1和PD1靠近并结合时,EU被激发发出的荧光共振转移到XL665上,使XL665发出荧光,从而被检测到。

当PD-1/PD-L1抑制剂存在时,将阻碍TAG1-PD-L1蛋白与TAG2-PD-1的结合,从而影响到XL665的荧光信号的强度。

筛选实验步骤

自动化解决方案

⬛ 根据实验步骤,制定自动化方案,主机型号如下:


⬛ AMTK LH1406多功能液体处理工作站台面布置


实验结果分析

⬛ 自动化加液与手工操作的IC50比较





⬛ 自动化加液与手工操作的一致性分析


⬛ 结论:AMTK LH1406多功能液体处理工作站实现了操作过程的完全自动化,并且各项性能指标达到要求。